单克隆抗体 （mAb） 由与特异性抗原高度特异性结合的 B 淋巴细胞的单个克隆产生。 除蛋白质结构外，单克隆抗体的聚糖链对其功能、生物分布、免疫原性和稳定性也有重要影响。 因此，分析单克隆抗体的糖型是药物开发的关键步骤。
以下是分析单克隆抗体糖型的常用方法：
1.毛细管电泳-质谱 （CE-MS）：
该方法特别适用于正糖型的分析。 毛细管电泳用于分离糖型，而质谱法用于结构鉴定。
2.液相色谱-质谱联用（LC-MS）：
可用于N-糖和O-糖的分析。 聚糖首先使用酶消化或化学方法从抗体中释放，然后使用液相色谱法进行分离，并通过质谱法进行结构鉴定。
3.荧光标记和HPLC分析：
聚糖首先释放并与荧光标签反应，然后使用HPLC分离和定量。
4.凝集素印迹：
使用特异性糖凝集素与特异性糖结构结合可用于鉴定特异性糖型结构。
5.NMR（核磁共振）：
可以提供有关糖结构的详细信息，但需要大量的样品，并且技术要求很高。
6.酶联免疫吸附测定 （ELISA）：
特异性糖型结合蛋白或抗体用于检测和定量聚糖。
每种技术都有其优点和局限性。 选择哪种方法通常取决于分析目的、可用样品量、所需的灵敏度和分辨率以及可用的仪器。 在药物开发的不同阶段，可能需要多种技术来全面评估产品的糖型异质性和一致性。