ELISA实验中的常见问题

酶联免疫吸附试验（ELISA）是一种基于免疫反应的高灵敏度测试技术，将抗原和抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合。 ELISA实验操作简单，但影响因素较多，一个因素的变化可能会影响其他条件的变化，最终影响整体结果的准确性。

操作点：标本。

对于血清标本，采血时应注意溶血。 此外，为了避免细胞裂解和靶标检测分子释放的影响，检测时应离心除去细胞成分。

配药。 注意将添加的材料添加到板孔底部，避免将其添加到孔壁的上部，不要飞溅或产生气泡。 添加不同物质时应更换吸头，以避免交叉污染。 此外，在显色时，最好使用排枪快速完成加药过程，以减少因反应时间不一致而引起的孔间变异性。

稀释。 在稀释过程中，重要的是使用相同的微量进样器、相同类型的吸头和容器，以确保稀释液体的体积一致。

孵化。 洗。

应严格按照要求进行洗涤，确保洗涤液充满所有孔洞，洗完板后，最好在吸水纸上轻轻拍干（选择干净、无尘或无尘的吸水材料），并严格遵守洗涤时间，不得马虎。

显色。 显色液的量不宜过多，样品的工作环境不宜在阳光直射的环境中，加入显色体系后应避免显色溶液，显色液量不宜过多，以免显色过强。

阅读看板。 附着在板底部的液体应用干净的吸水纸干燥，以减少比色前的干扰，然后将板正确放入酶标仪的杰作中。 酶标仪应放置在黑暗环境中，手术室温度应为15-30°C，酶标仪使用前应预热15-30分钟，这样测量结果更稳定。