人血管紧张素1,7,Ang1,7ELISA试剂盒 操作步骤

小夏 健康 更新 2024-01-31

一、操作步骤。

1.准备试剂。

根据需要制备适量的ELISA试剂盒,包括抗体、酶标记的二抗、标准品等。

2.准备标准溶液。

标准品按说明书上的要求进行稀释,一般采用双稀释法配制不同浓度的标准溶液。

3.配药。

将待供试样和标准溶液加入相应的微孔板中,按说明书上的试样用量加入相应的体积。

4.孵化。

密封微孔板并将其置于37°C一段时间,通常为1-2小时。

5.洗。

洗涤是ELISA实验中非常重要的步骤,需要根据说明书上的说明进行正确的洗涤操作。 洗涤的目的是去除未结合的材料并减少非特异性干扰。

6.添加酶标记的二抗。

洗涤完成后,加入酶标记的二抗,并根据说明书上添加的样品量加入相应体积。 然后再次密封微孔板,将其置于37°C一定时间。

7.洗。

与步骤 5 相同,执行正确的洗涤操作。

8.加入底物溶液。

洗涤完成后,加入底物溶液,并按说明书上的样品量加入相应体积。 然后将其置于室温下并在黑暗中孵育一定时间。

9.终止反应。

加入终止液以终止反应。 通常使用硫酸作为终止液。

10.检测读数。

在酶标仪上读取每个孔的光密度值并记录数据。 根据标准溶液的浓度和光密度值绘制标准曲线,然后根据待测样品的光密度值在标准曲线上计算浓度。

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