非洲猪瘟病毒抗体检测试剂盒（夹心法）使用说明书
名字：非洲猪瘟病毒抗体检测试剂盒
有可能的用途：该试剂盒用于检测猪血清中的非洲猪瘟病毒（ASFV）抗体。
实验原理：
非洲猪瘟病毒抗体检测试剂盒率先采用双抗原夹心法确定样本是否含有非洲猪瘟病毒（ASFV）抗体。 将重组ASFV抗原包被微孔板制成固定相，将样品加入涂有抗原的微孔中，然后与HRP标记的ASFV抗原结合，形成抗原-抗体-酶标记的抗原复合物，洗涤后用底物TMB着色。 TMB被HRP酶催化成蓝色，最终被酸催化成黄色。 颜色的深浅与样品中非洲猪瘟病毒（ASFV）抗体的数量呈正相关。 用酶标仪在450nm的波长下测量吸光度（OD值），并计算OD值以确定样品是否含有非洲猪瘟病毒（ASFV）抗体。
套件组成：
试剂制备：
1.1.洗涤液的配制：混合均匀后，将20浓缩洗涤液在去离子水中稀释20倍。
2.1.样品稀释剂的制备：取混合后的20倍样品稀释液，在去离子水中稀释20倍。
3.样品制备：使用前用 1 次样品稀释液稀释样品 10 倍（建议 20 μl 血清，180 μl 样品稀释）。
4.底物溶液（即用型）的制备：使用前，按1：1的体积比将显色溶液A与显色溶液B混合，避光保存。
程序：
使用前将试剂盒的所有组分和待测试样品平衡至室温。
1.根据上述试剂制备项目，配制各种试剂、阳性和阴性对照品及待检测样品;
2.计算检测样品所需的酶标记，将酶标记物从铝箔袋中取出，将剩余的酶标记物放回铝箔袋中，密封袋口，低温保存;
3.样品孵育：分别加入阴性对照、阳性对照和待测样品，并作记录，100升孔，混匀; 然后将酶标记的抗原加入微孔板中，50 l孔，混合孔，然后层压，37 孵育 30 分钟;
4.洗板：将液体倒入孔中，加入1个洗涤液（300升孔）洗板5次，拍干;
5.显色：将预先制备好的底物溶液加入微孔板中，100 l孔，混匀，在37 l下避光孵育10分钟;
6.终止：向微孔板中加入100l孔终止溶液，轻轻摇动微孔板，直至颜色均匀;
7.读数：在20分钟内读取450nm处的吸收值。
判决：
1.ASFV负参考的OD值表示为ODN; ASFV 阳性参考的 OD 值表示为 ODP; 样品的OD值表示为ODS;
2.截止值（阈值）的计算：截止值=ODN+015；
3.测试建立条件：ODN值015 且 ODP 值为 05、测试结果有效，否则将重新进行测试;
4.结果：样品OD值截止，结果为阴性; 截断样品的OD值，判断结果为阳性。
笔记：
1.请严格按照说明进行操作。
2.该套件应由经过充分培训的人员使用。
3.不同批号的试剂盒不能混用。
4.该套件的每个组件只能使用一次，不能重复使用。
5.整个实验应尽可能在清洁无尘的环境中进行。
6.使用前，试剂盒必须与待测试的样品平衡至室温。
7.浓缩洗涤液使用前需稀释20倍，若洗涤液结晶，放置37即可溶解。
8.为避免样品中出现任何潜在的生物危害，应将测试样品视为传染性样品，并避免与**和粘膜接触。
9.应每天使用洗板机，校正注液量和残留量，注意管道是否畅通无阻。 洗涤时，确认每个孔都装满了洗涤液。 每次洗涤后，将微孔中的液滴拍在无尘吸水纸上。 下一步应在板材清洗后立即进行，不应让板材干燥。 避免长时间中断方案，以确保油井之间的条件一致。
10.如果对照的测量值不在预期范围内，则实验无效，应重复实验。
11.该试剂盒中的所有试剂应储存 2-8 个月，有效期为 12 个月。 如果板条一次没有用完，则应将剩余的板条密封在塑料袋中并密封保存。
12.该试剂盒仅供体外诊断使用。