红曲是一种腐生真菌,具有典型霉菌的特点,喜欢温暖和潮湿,能形成非常分枝的菌丝体,肉眼可见絮状,红色、棕色或无色,红曲具有很强的生存能力,可以在pH35范围内生长,能耐受10%体积乙醇,能在含有25%甘油的培养基中生长, 可以使用葡萄糖、麦芽糖、淀粉、甘油、山梨糖醇、乳酸等。 但是,它在分类学上不属于霉菌,红曲属于真菌界,子囊菌门,真子囊菌门,子囊菌门和红分枝杆菌门。
目前,中国科学院微生物菌株采集管理委员会官方收藏保存的红曲共有8种,共48株anka)、红曲(M.)。Ruber)、红曲霉(M.)。purpureus)、烟熏红曲霉(M.fuliginosus),F.佛罗里达红曲(M.)。佛罗里达人)、红红曲血(Msanguineus)、红曲霉(M.)。pilos)、红曲橙(M.)。aurantiacus)、红曲血病(M.)。sanguineus)和红曲霉(M.)。pallens)等。
红曲在自然界中分布广泛,可产生多种酶:淀粉酶、蛋白酶、糖化酶、-葡萄糖苷酶、酯酶等。 红曲可产生红曲、红曲红素、红曲、红曲、正葡糖基红斑胺、N-葡萄糖基红斑胺、N-葡萄糖基红斑胺、N-谷芳酰胺等红色和黄色色素。 红曲代谢物还包括柑橘素、莫纳可林K、氨基丁酸(GABA)等。
松河白酒采用老五庸工艺,配料以大米检验,不同大米检验所生产的原酒质量参差不齐。 本试验以松河中高温大曲为实验材料筛选出一株红曲,以该品种红曲为研究对象生产酯化红曲,并将不同品质的酯化红曲加入松河酒酿造生产车间进行实验,为今后红曲的生产试验奠定了基础。
1 材料与方法
1.1 材料、试剂和仪器
实验原料:中高温大曲,来自松河白酒酒曲车间; 麸皮,市售的优质麸皮。
试剂和耗材:氢氧化钠、乳酸、盐酸、酚酞、己酸、无水乙醇、葡萄糖、硫酸铜、10 g l 亚甲基蓝溶液,pH 46.缓冲溶液,25mol L硫酸溶液、凡士林、牛肉酱、蛋白胨、琼脂粉、麦芽输液粉、酵母糊等。
仪器设备:可见分光光度计(721型、上海岳丰仪器***气相色谱分析仪(GC102AT气相色谱仪、安捷伦科技(中国)**电子天平(MD200-3型)、上海敏桥精密科学仪器***电动鼓风机、新型冲泡平台、原装烘箱(101型、北京永光医疗仪器***真空过滤装置; 电动恒温水浴(HH-6型,金坛市金南仪器制造***循环水多用途真空泵(SHZ-D()型,天津华鑫仪器厂); 电子万能炉(DL-100型,天津试验仪***振动台; 试管; 烧杯; 玻璃棒等
1.2 实验方法
1.2.1 酯化红曲米生产工艺。
该试验使用以下工艺进行:纯种红曲活化种子培养基 扩增培养 接种盒 酒曲酯化红曲。
1.2.2 检测方法。
酯化红曲米的检测方法:水分含量采用电干燥法[6],糖化能力采用Feilin试剂法[7],酯化能力采用皂化法。
渣滓的检测方法为:水分采用电干燥法,淀粉采用Feilin试剂滴定法[7],酸度采用酸碱中和法。
1.2.3 协议。
方案一:1池、2池、3池加入红曲米至粒量的5%,将中高温曲量减至粒量的2%5%。
方案2:实验4、实验5、实验6 将红酵母的量加到谷物3的量中5%,减去谷物量为175%。
方案3:实验7、实验8、实验9 将红曲米的量加入谷物2的量中75%。
2 结果与分析
2.1 红曲的筛选和分离结果
以松河中高温大曲为实验材料筛选红曲,分别将中高温大曲和高温大曲中心有粉红色或红色菌落的部分粉碎,加入一定量的无菌水,将细菌悬浮液在150 r min、30振荡器中孵育1 h, 然后将1ml上清液加入到9ml无菌水试管中,然后依次用无菌水稀释至10-2 10-7,共7个梯度,涂在改良的麦汁培养基板上。
30 恒温培养3 5 d,选取具有红曲基本形态特征的菌落,转移到改性麦芽汁培养基的斜坡上,在相同培养条件下继续培养,采用亚分离纯化法进行纯化培养。 经过几次重复纯化培养后,将所得纯培养物接种到由麦芽汁培养基制成的斜坡中保存。 经过多次筛选和纯化,得到一株红曲,保存在松河酒研究中心的培养保存室。
2.2 红曲酵母酸酯化结果
选定的红曲经过纯化并用于生产酯化红曲。 熟料麸培养生产的酯化红曲红曲健壮饱满,色泽红红鲜亮,有特殊的酯类香味,酯化红曲的酯化力与中高温曲酸化不同,结果见表1。
从表1可以看出,酯化红酵母的酯化容量水分含量略高于中高温大曲。 酯化红曲米的酸度也略高于中高温曲。 酯化红曲米的酯化能力明显高于中高温大曲,是中高温大曲的3倍以上。
2.3 红曲米生产及应用实验结果
2.3.1.实验前后的理化指标。
通过在酒糟中加入一定量的酯化红曲米,并相应地还原一定量的中高温曲,设计了3个方案,分别是方案1、方案2和方案3,三种试验方案中酯化红曲米的添加量不同, 每个方案选择三个酒窖进行测试。
酯化红曲米除酯化能力强外,还能产生淀粉水解酶和蛋白酶分解淀粉和蛋白质,影响渣滓的残留淀粉含量、酸度和水分含量。 渣滓中的水分不仅是微生物生化反应的必要介质,是生长繁殖和代谢活动的必要条件,而且在生产优质白酒中也起着重要作用。 酒糟中的酸能为有益微生物提供营养,在酒体内生成各种风味物质,促进酯类的形成,试验前后不同方案酒糟的理化分析结果见表2。
从表2可以看出,方案1中水稻含水量平均增加1841%,池塘大米的酸度平均增加281倍,与池塘内淀粉相比,池塘内大米淀粉平均减少54倍84%;在方案2中,池塘中稻粒含水量的平均增加量为1472%,池塘大米的酸度平均增加195次,池塘水稻淀粉平均减少48次04%;方案3中,池塘水稻含水量比池塘含水量平均增加1469%,池塘大米酸度增加182次,池塘外大米淀粉平均减少41次18%。
在葡萄酒生产过程中,淀粉、蛋白质等物质主要分解成乙醇、水和一些芳香、有味道的物质。 方案1淀粉减少最快,渣滓水分增加最多,说明方案1在相同条件下产酒较多,这也间接表明酯化红曲米具有提高白酒产量的能力。
2.3.2.实验酒窖池中葡萄酒样品的色谱结果和产量结果。
从表3可以看出,方案1的平均收益率为33981 公斤,4248%;方案1:原液中己酸乙酯的平均含量为31734 克升,即 3539%,四大酯类总含量增加3311%,与对照坑相比,乳酸乙酯下降了3472%;方案1:生产的原液**中己酸乙酯的平均含量为16793 克升,即 1875%,与对照相比,乳酸乙酯下降了3507%。
从表4可以看出,情景2的平均收益率为32383 公斤,4048%;方案2生产的高档白酒中己酸乙酯的平均含量为31455 克升,即 3420%,四大酯类总含量增加1641%,与对照相比,酒窖池乳酸乙酯减少了4152%;方案2 生产的原液**中己酸乙酯的平均含量为16546 g l,比对照酒窖中己酸乙酯高17%,比对照酒窖中乳酸乙酯低49 g l22%。
从表5可以看出,情景3的平均收益率为30038 公斤, 3755%;方案3:所生产高档白酒中己酸乙酯的平均含量为30460 克升,即 2995%,四种酯类的总含量增加了1885%,与对照相比,乳酸乙酯减少了3705%;方案3 生产的原液**中己酸乙酯的平均含量为16530 克升,即 16.高于对照酒窖中的己酸乙酯89%,与对照相比,乳酸乙酯减少了4580%。
2.3.3 感官品尝结果。
3名国家品酒师和5名省级品酒师将对白酒的色泽、香气、口感和风格进行评价,并根据相关文献和实际情况进行联合评价和评分。 感官评估结果如表7所示。
优质作者名单
从表6和表7可以看出,在酿酒的生产过程中加入一定量的红曲米时,原液中己酸乙酯的含量显著增加,乳酸乙酯的含量显著降低。 在酿造生产过程中加入一定量的红曲米时,感官评价效果较好,复合香气优于对照样品,柔软度优于对照样品。 与对照样品相比,混合红曲米混合样品乙酯含量增加了3247%,红曲米混合样品新酿造平台中己酸乙酯含量较对照样品增加1591%;与对照样品相比,红曲米混合样品的乳酸乙酯含量降低了3642%,与对照样品**相比,红曲米混合样品**增加了3562%。
随着红曲米添加量的增加,原液中己酸乙酯的含量也有所增加,方案1与方案2的差距较小,但均优于方案3。 基于以上因素,结合综合成本效益,初步确定方案2较好,即白酒生产过程中红曲的添加量为35%,减去谷物量为1在75%时,原酒的质量很好。
3 讨论
本试验以宋河中高温大曲为实验材料,通过富集、初筛、再筛等方法,选取弯道中心的红色或粉红色部分,根据红曲菌落形态特征和显微观察初步确定一株红曲。 以熟料麸皮为试验介质生产的酯化红曲红曲,生产的红曲健壮饱满,色泽红亮,有特殊的酯香味,其酯化力是普通中高温大曲酯化力的3倍以上。
结果表明,在含酯化红曲米的实验酒窖中,原酒己酸乙酯和总酯类含量显著增加,原酒感官品感效果明显较好。 对比三种添加方案,可以看出方案1和方案2的增加较为明显,并结合上述因素并结合综合成本和效益,初步确定方案2较好,即酿造生产过程中红曲米的添加量为35%,减去谷物量为1在75%时,原酒的质量很好。
本实验是一次富有成效的实验,浓香型白酒的生产过程是一个开放的过程,可能会受到许多外部自然因素和人为因素的干扰。 在以后的实验中,我们将尽量避免外界因素的干扰,增加并行试验的次数,以保证实验的准确性、可靠性和可重复性。