细胞增殖的速度怎么会变得如此缓慢? 当细胞患病,细胞变圆,它们从烧瓶壁上掉下来时会发生什么? 这太疯狂了,为什么在实验中生长存在的细胞如此困难“幽灵”。,即使是经验丰富的老手也不得不面对,是的,确实如此支原体感染
支原体感染的威胁
支原体感染率高达63%。这也使得细胞培养过程中的“支原体污染”问题遍及全球,研究人员在涉及支原体污染时经常感到困惑。
它是一种原核微生物,类似于细菌但没有细胞壁,直径为50-300nm,可以很容易地通过0将22um滤膜混合到培养系统中,普通抗生素(如培养细胞中常用的双特异性抗体)对其不起作用。
此外,细胞培养物通常没有明显的支原体污染迹象,不像细菌或真菌污染肉眼有明显的变化,甚至细胞本身也可以在一段时间内继续保持正常的形态和增殖率。
这些特征给我们在判断和处理支原体污染方面带来了一些麻烦。
可能这会导致实验结果不准确因为支原体与培养基中的其他成分相互作用,影响其他微生物的生长,从而干扰实验结果的收集和分析。
支原体污染可能对以下因素产生积极影响实验设备、仪器造成损坏,特别是对于实验室的生物安全柜和其他相关设备,因为支原体会在其上生长并形成细菌膜,从而影响设备的正常运行。 如果支原体数量少,可能对测序结果没有明显影响。
如果支原体数量众多,它们可能会在测序过程中影响样本的质量,因此造成测序结果不准确。此外,支原体污染可能导致样品中序列读数减少,从而影响后续分析结果,例如序列组装和基因表达分析。
因此,测序前应采取适当措施避免和减少支原体污染,如采用无菌技术、严格控制实验室环境、使用高质量的试剂和仪器等。 如果支原体污染已经发生,应及时检测和处理,以减少对测序结果的影响。
支原体检测方式
我们对此并不茫然,通过严格的消毒措施和合理的实验室管理,可以有效预防支原体感染,保证研究的顺利进行。 鉴于支原体污染对细胞生物学实验的重要负面影响,定期检测细胞是否存在支原体污染已成为许多实验室的必然选择。
常见的支原体检测技术包括:分离培养法、DNA荧光染色法等,但这里更推荐等温扩增。其中,分离培养法和DNA染色法的操作难度较大,而等温扩增法浓度低,细胞毒性低,使用方便,即用型,只要加入支原体污染的培养细胞中孵育一周即可