蛋白质磺酸修饰是一种不太常见但很重要的蛋白质翻译后修饰方式。 它涉及将磺酸基团添加到蛋白质的特定氨基酸残基中,通常是酪氨酸残基。 与磷酸化不同,磺酰化是一种共价的永久性修饰。
图1鉴定蛋白质翻译后修饰的示意图。
检测蛋白质磺化的常用方法主要有以下几种:
1. 质谱(MS):
由于磺化引起的质量增加,LC-MS MS可用于识别磺化位点。 然而,磺酰化肽可能会在MS中失去磺酸基团,这使得鉴定具有挑战性。 MS的数据解释通常需要特定的生物信息学工具,以确保正确识别磺酰化位点。
2. Western blot和磺酰化特异性抗体:
使用磺酰化蛋白或磺酰化位点特异性抗体可通过蛋白质印迹检测磺化状态。
3.免疫荧光染色
使用磺酰化特异性抗体,磺酰化蛋白可以通过免疫荧光染色定位于细胞或组织切片上。
4. 酶联免疫吸附测定(ELISA):
使用磺化特异性抗体,可以设计用于磺化蛋白的定量分析。
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