蛋白质标记定量是一种实验技术,用于分析实验中与特定标记分子结合的蛋白质的表达和调控,以量化特定蛋白质或多种蛋白质在不同样品中的表达水平。
蛋白质标记物定量的关键步骤通常包括:
1. 蛋白质提取
首先从所研究的生物样品中提取蛋白质,例如细胞、组织或体液。
2.蛋白质标记:
将蛋白质与化学或同位素标签结合。 这些标签可以是稳定同位素标记(例如硅胶)、同位素标记的氨基酸(例如 ITRAQ)或其他特定的化学标记。 这些标记物使研究人员能够在随后的分析中区分和量化不同样品中的相同蛋白质。
图1使用SILAC(Esthelle等人)进行蛋白质定量。,2019)
3. 蛋白质分离鉴定
通过液相色谱 (LC)、二维凝胶电泳 (2D-PAGE) 和其他技术分离蛋白质。 之后,通常使用质谱 (MS) 技术鉴定和定量标记的蛋白质。
4. 数据分析
使用生物信息学工具分析获得的数据,并比较不同样品或处理之间蛋白质表达的差异。
图2SILC 与二甲基标记。
蛋白质标记物定量服务在生物医学研究、药物开发、疾病诊断等领域有着广泛的应用,特别是在研究蛋白质在不同条件下如何表达和调控方面。 通过定量分析蛋白质表达,研究人员可以更好地了解疾病的机制,发现潜在的生物标志物,或评估药物的作用。
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