ACE2重组蛋白的制备和表征

血管紧张素转换酶 2 （ACE2） 是一种跨膜蛋白，是肾上腺素转换酶 II （ACE） 家族的成员。 它是一种含有 805 个氨基酸残基的蛋白质，具有多个结构域，包括 N 端信号肽、细胞外区域、跨膜区域和 C 端结构域。 货号聚α烯酸1000-6875

ACE2主要通过其胞外结构域与血管紧张素II相关的肽分子结合，并将其代谢为血管紧张素1-7，从而在血压平衡和纤维化甚至炎症反应中发挥重要作用。

ACE2蛋白的制备和表征是研究其生物学功能和开发相关药物的关键步骤。 通过重组技术制备的ACE2蛋白可用于体外实验，以模拟与其配体或病原体的相互作用，并进一步揭示其分子机制和生理功能。

2.实验准备。

第 1 步：克隆目标序列。

采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术从人肺组织中扩增ACE2基因，利用限制性内切酶将扩增产物与表达载体连接，构建靶ACE2基因的重组表达载体。

第 2 步：转染宿主细胞。

将重组表达载体转染到CHO细胞或其他合适的宿主细胞系中，经过筛选扩增，得到稳定表达ACE2蛋白的细胞系。

第 3 步：蛋白质的表达和纯化。

将细胞培养至对数生长期，然后加入诱导剂（例如，异丙基-D-硫代半乳糖苷，IPTG）以刺激ACE2基因的表达。 收获细胞，经超声破碎和离心后得到含有目标蛋白的细胞裂解物。 使用跟踪放射免疫沉淀或亲和层析等技术纯化靶标 ACE2 蛋白。

第 4 步：蛋白质分析和鉴定。

使用 SDS-PAGE、蛋白质印迹或质谱等技术分析纯化 ACE2 蛋白的分子量、抗原性和纯度。

第 5 步：功能鉴定。

采用细胞结合试验或酶活性试验等方法验证重组ACE2蛋白能否与冠状病毒相互作用并发挥相关功能。