创意灵感中心 细胞因子检测试剂盒、内分泌检测试剂盒、肝纤维化检测试剂盒、心肌梗死检测试剂盒、肿瘤标志物检测试剂盒、自身免疫检测试剂盒、优生检测试剂盒、传染病检测试剂盒等。
1.固相载流子选择。
聚苯乙烯：对蛋白质的吸附能力很强，抗体或抗原吸附在其上后，保留原有的免疫活性。
聚氯乙烯：聚氯乙烯对蛋白质的吸附性能高于聚苯乙烯，但空白值也略高。
好的ELISA板应具有良好的吸附性能、低空白值、孔底透明度高、板与同一板孔之间性能相近。
2.涂层。 板孔的选择：ELISA级微孔板
抗体选择：选择支持ELISA实验的抗体，按推荐浓度稀释或探索合适的浓度。
涂层缓冲液：pH 96. 碳酸盐缓冲液或 pH 72 个磷酸盐缓冲液。
涂布温度：2-8过夜涂布或室温（37）涂布2h
涂层浓度：涂层浓度会因载体和涂层的性质而有很大差异。 一般包衣浓度为10ug ml-20ug ml。
3. 关闭。 包被后立即阻断（阻断非特异性抗体）
选择效果较好的封闭剂（细胞培养级BSA、吐温等）。
4.取样和孵化。
添加时，应将添加的物料加入ELISA板的孔底部，避免将其添加到孔壁的上部，并注意不要溅出，不要产生气泡。
孵育的时间和温度参考试剂盒说明。 如果可能，建议使用振荡器**仪器进行样品孵育，推荐轨道直径为3mm，转速为500 50rpm
检测抗体和酶标记物的稀释比例、孵育温度、孵育时间严格按照说明书进行
洗板是ELISA确保其特异性的关键步骤。
密封膜必须一次更换一层，不宜使用两次甚至多次，以防交叉污染。
5. 显色和终止
使用前检查底物是否无色透明，然后再添加到96孔板中。
显色底物需要制备和使用，以避免污染。
孵育时间是说明书上的参考范围，需要根据实验条件自行探索。 可以参考标准浓度的大孔的颜色，当它变得更明显的蓝色时可以使用。
大鼠ELISA试剂盒注意事项：
1.将大鼠ELISA试剂盒储存在2-8，并在施用前在室温下平衡20分钟。 结晶发生在从冰箱中取出的浓缩洗涤液中，这是正常现象，在使用前在水浴中加热以溶解晶体*。
2.试验中未使用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
3.孵化操作应严格按照澄清书中注明的时间、数量和顺序进行。
4.在使用所有液体成分之前摇匀。