人白细胞介素 1 前体 ELISA 试剂盒的操作程序

1.实验原理。

本实验采用ELISA双抗体夹心法，将人白细胞介素1前体特异性抗体包封，然后加入酶标记的二抗与捕获的人白细胞介素1前体特异性结合，最终通过底物显色反应将人白细胞介素1前体的含量转化为光信号， 根据光信号的强度计算人白细胞介素1前体的含量。

2. 步骤。

1.微孔板和待测样品的标准品制备：将标准品和待测样品用稀释剂稀释并加入到微孔板的不同孔中。 注意：每孔添加相同量的样品，避免气泡。

2.封闭：将板在37下孵育1小时以封闭未结合的位点。

3.洗涤：清洗板以去除未结合的材料。

4.加载：将稀释后的生物素化抗体加入相应的孔中，充分混合，以 37 倍孵育 1 小时。

5.洗涤：清洗板以去除未结合的材料。

6.加入酶：将稀释的HRP标记的二抗加入相应的孔中，充分混合，并在37下孵育1小时。

7.洗涤：清洗板以去除未结合的材料。

8.显色：加入底物溶液，在37°C孵育15-30分钟。

9.停止：加入终止液以终止显色反应。

10.检测：用酶标仪检测各孔的光密度值，并记录数据。

3.注意事项。

1.在操作过程中，必须确保无菌操作，以防止污染。

2.分配时，请确保添加相同的体积以避免产生气泡。

3.孵育过程中应注意温度控制，以免影响实验结果。

4.显色反应的时间应加以控制，以免影响光密度值的测定。