近年来,在各方的努力下,细胞STR的鉴定逐渐得到重视。 许多实验室已开始定期对培养的细胞系进行STR表征。 然而,细胞的定期支原体检测仍然被忽视,大多数实验室只在怀疑细胞被支原体污染时才进行支原体检测,此时细胞腔中的所有细胞都可能被不同程度的支原体污染!
支原体,也称为支原体,是迄今为止发现的最小和最简单的原核生物。 大约30%-60%的细胞培养物在细胞培养过程中被支原体污染。 由于支原体的尺寸非常小,直径仅为 01-0.3 m,加上形态多变,有球形、棒状、丝状、支枝状等形式,因此实验室和生物制品厂在细胞培养过程中容易受到支原体污染。
支原体形态学)。
细胞的支原体污染不仅会影响细胞的生长状态和形态,还会影响细胞的正常代谢和功能,如细胞中蛋白质、DNA和RNA的合成紊乱,影响细胞信号传导,染色体异常等。 如果结果是在支原体阳性细胞中获得的,实验数据肯定会影响结论的有效性。
细胞被支原体污染)。
更重要的是,一些主流的SCI期刊(如IJC)和细胞相关组织(如ICLAC)对细胞中支原体的检测做出了明确的要求,无论是在日常细胞培养中还是在投稿前,支原体检测都应与细胞的STR鉴定同时进行。
ICLAC的指导文件“细胞系认证是日常细胞培养实践的一部分”,其中指出:“所有细胞系都应进行常见微生物污染检测,如支原体。 还需要检测病毒污染,具体取决于细胞系类型和您的具体应用。 ”
拉克拉克)。
IJC的作者指南指出,“证明所有实验均使用无支原体细胞进行的声明”指出,“[在提交时]提供了所有实验均使用无支原体细胞进行的声明。 此外,IJC编辑部发表的一篇文章也建议:“如果细胞系是从二级**(例如,从事基础研究的同行)获得的,则该细胞系应在不使用抗生素的情况下分离培养,直到通过STR分型确认细胞身份;同时,还应检测细胞系的无菌性和支原体。 ”
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因此,与STR鉴定一样,定期支原体检测应是实验室日常细胞培养工作的重要组成部分
目前,支原体检测的主流方法是PCR。 苏州健达的支原体检测试剂盒是基于PCR的试剂盒,可检测528种支原体,保证了高特异性,优化了PCR广谱差的问题。
参考资料: 1www.jsdna.org/cell
3.**cell line authentication part of everyday cell culture practice. iclac.
4.nicole y souren et al., cell line authentication: a necessity for reproducible biomedical research. embo j.2022 jul 18;41(14):e111307.
苏州基因检测生物技术(GTB)采用STR分型技术检测出21个人细胞位点和小鼠细胞19个位点(18个小鼠位点+1个人位点TH01),采用3130XL基因分析仪进行毛细管电泳。对照ATCC等数据库,出具权威英文报告,为全国近500家科研机构(高校、科研院所、医院、企业)提供优质服务,多家单位利用建达细胞株鉴定服务在高水平期刊(如临床癌症研究、Nature Commnications、 Int J 癌症等)。
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