仅供体外研究使用,不用于临床诊断!
牛双载蛋白 (AMPH) ELISA 试剂盒。
牛双载蛋白 (AMPH) ELISA 试剂盒。
[样品处理和要求]。
1.血清:将收集在血清分离管中的全血标本在室温下放置2小时或4过夜,然后以1000g离心20分钟,上清液可在-20或-80°下取或保存,但应避免反复冻融。
2.血浆:收集以EDTA或肝素为抗凝剂的标本,收集后30分钟内以2-8 1000 g离心标本15分钟,取上清液检测,或将上清液保存在-20或-80,但避免反复冻融。
3.组织匀浆:使用预冷的PBS(001m, ph=7.4)冲洗组织,除去残留的血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织切碎。将切碎的组织与相应体积的PBS进行比较(一般按1:9的重量体积比,例如,1g组织样品对应9ml的PBS,可根据实验需要适当调整比容,并应做好记录。 建议将蛋白酶抑制剂添加到PBS中)到玻璃均质器中,并在冰上研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以将匀浆超声处理或反复冻融。 将匀浆以5000g离心5 10分钟后,取上清液进行检测。
4.细胞培养上清液或其他生物标本:以1000g离心20分钟,取上清液进行检测,或将上清液在-20或-80下保存,但避免反复冻融。
注意:标本溶血会影响后续检测结果,因此溶血标本不宜进行本检测。
牛双载蛋白 (AMPH) ELISA 试剂盒。
[试剂制备]。
实验程序应从冷藏环境中取出,在室温下平衡后方可使用。
20洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即20洗涤缓冲液的1份加上蒸馏水的19份。
操作步骤】1、室温平衡20min后,从铝箔袋中取出所需的板条,用自封袋将剩余的板条密封后放回原处 4.
2、设置标准孔和样孔,每标准孔加入不同浓度的标准品50 L
3.将50升待测样品加入样品孔中不添加空白孔。
4.除空白孔外,在标准孔和样品孔各孔中加入100 L辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体,用密封膜密封反应孔,反应孔在37水浴或培养箱中孵育60min。
5.倒掉液体,在吸水纸上拍干,每孔装满洗涤液(350升),静置1min,甩掉洗涤液,在吸水纸上拍干,重复洗盘5次(也可以用洗衣机洗盘)。
6.向每个孔中加入50 L底物A和50 L底物B,并在黑暗中孵育37分钟。
7.向每孔中加入50 L终止液,在15min内以450nm的波长测量各孔的OD值。
牛双载蛋白 (AMPH) ELISA 试剂盒。
[程序]。
1.标准品稀释:该试剂盒提供主要标准品,可根据随附说明中的图表在小试管中稀释。
2.填充:分别设置空白孔(空白对照孔不添加样品和酶标记试剂,其余步骤相同)、标准孔、待测样品孔。 精密在微孔板上加入标准品50 l,向样品孔中加入样品稀释液40 l,然后加入待测样品10 l(样品最终稀释度为5倍)。 尽量将样品加入微孔板孔底部,尽量不要接触孔壁,轻轻摇晃混合。
3.孵育:用密封膜密封板,孵育后放置37分钟。
4.制备方法:用蒸馏水将30倍浓缩洗涤液稀释30倍,备用。
5.洗涤:小心取下密封膜,弃去液体,甩干,将洗涤液装满每个孔,静置30次后丢弃,重复5次,拍干。
6.添加酶:每孔加入 50 l 酶标记试剂,空白孔除外。
7.孵育:操作与3相同。
8.洗涤:同5。
9.显色:向每孔中加入显色剂A50 L,再加入显色剂B50 L,轻轻混合,37避光10分钟。
10.终止:每孔加入 50 l 终止液以终止反应(此时蓝色变为黄色)。
11.测定:依次测量各孔的吸光度(OD值),对空白孔进行零点调整,波长为450nm。 测定应在加入终止溶液后15分钟内进行。
牛双载蛋白 (AMPH) ELISA 试剂盒。
牛双载蛋白 (AMPH) ELISA 试剂盒。
[售后]。
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2.请在收到电芯当天及第2、3天拍照,未通知者视为合格。 如果在4-10天内出现问题,请提供电芯**的详细步骤和电芯相关操作**,并及时与我公司人员沟通决定是否重新发放,可以参考我公司官网或相关售后条款的配套说明。