固态发酵(SSF)是指在介质为固体的状态下进行的一种或多种微生物发酵过程,虽然富含水分,但没有或几乎没有自由流动的水,而基质(基质)是不溶于水的聚合物,不仅可以提供碳源、氮源、 微生物所需的无机盐、水等营养物质,也是微生物生长的场所,是人类利用微生物生产产品历史最悠久的技术之一。
近年来,固态发酵工程领域取得了一些重大进展,主要局限于基质(基质表征、基质预处理和基质灭菌)、无菌操作相对性和工艺控制参数(水分活度、通风传质、温度和pH值)的研究。
基质(基质)研究:
在固态发酵中,固体底物不仅提供微生物所需的营养物质,而且作为细胞的固定物质,能够提供微生物所需的全部营养物质的底物被认为是理想的底物。 底物在固态发酵中具有独特的作用,影响微生物在微生物发酵过程中的传质、传热和代谢功能。 因此,对基质的研究比较透彻,主要集中在基质的特性、预处理和灭菌上。
01基质特性。
微生物要想在基质上生长并产生代谢产物,必须受到基质本身的物理因素(基质粒径、形状、孔隙率、纤维含量、粘度、颗粒间扩散率等)和化学因素(聚合、疏水性、结晶度、电化学性能等)的影响。
然而,底物粒径和湿度或水分活度(参见工艺控制参数)对于固态发酵中的微生物生长和活性最为重要。
底物颗粒的大小直接影响单位体积的反应表面积,也影响颗粒间细菌的生长、供氧速率和二氧化碳去除速率。
gamila.以甜菜为底物,通过单胞菌固态发酵生产乙醇,研究了甜菜粒径对乙醇产物的影响,结果表明,小颗粒明显有利于乙醇收率的提高。 raopvetal.当使用米糠固体生产脂肪酶时,发现颗粒从500 lm减少到177 lm,脂肪酶活性从8 lm增加到86 至 18UPG。 Pandey采用黑曲霉固体发酵法研究了底物麸皮粒径对葡萄糖苷酶的影响,最佳粒径为425)600lm,但如果使用小于180lm,则大于1以4mm混合颗粒为基材,可达到与425)600lm颗粒相同的效果。
基材预处理与吸收:
大多数底物是聚合物,它们不仅不溶于水,在微生物发酵开始时不易受到攻击,而且底物往往缺乏某些微生物所需的营养物质,需要外加。 为了使基材更容易被微生物利用,通常对基材进行化学或机械预处理。
基材预处理的方法有很多,包括:蒸汽爆破、浸出、粉碎、裂解、研磨等机械处理和碱化学处理。 微生物的生长应归因于其分泌的酶有效分解底物的程度。 然而,底物的物理和化学因素都可以促进或限制微生物的生长。
以下因素决定了微生物对底物的水解和利用:(1)微生物分泌酶的种类;(2)微生物对酶解产物的利用和生长状况;(3)酶、底物和水解产物的消耗;(3)酶的扩散速率;(4)被攻击的基板区域;(5)基板不均匀性;(6)最终产品的反馈抑制;(7)微生物对易降解碳源的要求;(8)酶动力学等
介质灭菌:
我们知道,随着反应器的放大,培养基的大规模灭菌会带来许多问题,例如:培养基理化性质的变化,有毒化合物的形成,营养物质的流失。
灭菌加热和冷却时间随介质大小而变化,灭菌过程受不同因素的影响,如杀灭微生物的速度(与微生物的活细胞成正比),以及不同微生物对温度的敏感性。 对于大规模杀菌,一般采用高温短时的方法,这样可以降低因受热而破坏营养物质的概率。
在工业生产中对培养基进行杀菌时遇到的另一个棘手问题是,培养基中的某些有机成分容易受热分解,甚至在较高温度下相互作用,形成对微生物有毒的物质。
有时培养基灭菌除了杀灭微生物外,还应考虑温度对基材理化性质的影响。 例如,麸皮(培养基中常用的物质)的理化性质在较高温度下会发生变化,这通常有利于微生物的吸收,因此灭菌时间较长。