植物细胞中基因电转移稳定表达的转化体电转换培养

这一步可以应用于卡那霉素抗性基因，也可以应用于新霉素磷酸酶抗性基因。

将上述稀释的原生质体转化体放入2ml原生质体培养基中，并将它们加入30x10mm培养皿中进行培养。

在孵育的第三天，开始降低培养基的通透性，即仅加入3-4%蔗糖（或葡萄糖）而不加入渗透稳定剂。 愈伤组织中等 （cm） 适用于下一步。 也就是说，在培养的第五天，加 032毫升厘米，在培养的第六天加入0。48ml cm。

在培养的第七步中，将细胞从培养皿底部轻轻分离并转移到60x15mm培养皿中。 然后，加入含有 200 毫升卡那霉素和 1含有8%琼脂糖的CM培养基，在凝固前与细胞充分混合，并在40下放置15分钟，使培养基固化。 将固体培养基分成八个分段，转移到100x15mm培养皿中，加入5ml含有100g卡那霉素的cm液体培养基并继续培养。

在孵育的第九天，再加入含有100g卡那霉素的5mlCM液体培养基。 当达到孵育的第14天时，从培养皿中吸出5ml培养物，再加入5ml新鲜培养物，并在两周内重复此过程。

当愈伤组织长到直径为2 3mm时，转移到含有100ml卡那霉素的固体CM培养基中。 这样，在这种选择性培养基中继续生长，直到它生根发芽。