微生物样品保存是指保存微生物菌株的活力和遗传特征的技术。 微生物在使用和传代过程中容易受到污染、突变甚至死亡，通常会导致菌株降解。 菌种保存的目的是保持菌种的活力，避免流失，防止外来微生物污染，尽量减少或防止突变，保持菌种原有的活力和特性。 培养保存的基本原理是使微生物的生命活动进入半永久性休眠状态，即将微生物的代谢限制在最低限度。
实验室常用的保鲜方法有甘油保鲜法、斜面保鲜法、穿刺保鲜法、液体石蜡覆盖法、沙漠土壤保鲜法、冻干法等。 在这些保存方法的基础上，微生物开发了一种陶瓷珠保存方法，可以更有效地保存菌株。
1.甘油保存
该方法适用于培养物的中长期储存，可储存1年以上。 由于甘油本身较稠且难以配量，因此通常与生理盐水以1：1的比例混合，制成终浓度为50%的甘油溶液。 使用时应与菌液按甘油50%：1：1的比例混合，使甘油终浓度达到20%-30%，甘油浓度过高或过低均不利于培养物的保存。 将甘油培养物移至 -80 冰箱中长期冷冻。 当需要使用培养物时，将冷冻管置于 37°C 水浴中并快速解冻直至培养物完全解冻，然后取出培养物进行实验。
该方法应用范围广，操作简单，保质期长，不易变异。
2.斜面保存方法
将菌株接种到合适的固体斜坡培养基中。 一旦细菌充分生长，将其转移到 4°C 冰箱中储存。 保质期取决于微生物的类型。 一般来说，霉菌、放线菌和孢子形成体需要每2-4个月传代一次，酵母菌每两个月传代一次，细菌最好每月传代一次。 当需要培养时，可以通过接种环从倾斜的平面接种少量细菌。
这种方法的优点是操作简单，使用方便，不需要特殊设备，并且可以随时检查保存的细菌是否死亡、变异或被外来细菌污染。 缺点是保质期短，菌株容易发生突变，因为培养基的理化性质不是严格恒定的，反复传代会改变微生物的代谢，这种方法被外来细菌污染的概率很高。
3.穿孔保存方法
准备一管半固体运输培养基，用接种针挑取培养物，从半固体培养基中心垂直穿刺，直到接近管底，但不要穿刺，然后沿原穿刺线拉出接种针，放入4冷冻室储存。 这种方法与斜面保存方法一样，需要定期传代。
4.一种液体石蜡覆盖层保存方法
这种方法是斜面保存法的辅助方法。 将菌株接种到合适的固体斜坡培养基中。 一旦细菌充分生长，注入无菌液体石蜡以覆盖整个斜坡，并将其直立存放在 4 冰箱中。 液体石蜡可以防止菌株因介质中水分蒸发而死亡，还可以将菌株与空气隔离，降低菌株的代谢活性，延长储存时间。 当需要菌株时，可以使用接种环从斜面上拾取少量菌株。
这种方法的优点是操作简单，不需要特殊设备，不需要频繁通过，储存时间长。 缺点是存放时必须直立放置，占用空间大。
5.沙漠土壤保护法
将培养的菌株与无菌沙漠土壤混合，以吸附沙漠土壤载体上的细菌。 干燥后，转移到 4°C 冰箱中储存。 使用培养物时，只需取出几粒沙子即可。
该方法操作简单，培养物保质期长。
6.冷冻干燥
冷冻培养物，并通过加压升华除去水分。 这可以降低细胞的生理活性，使细菌长时间存活。 当需要使用培养物时，使用无菌水或培养基重悬细胞，然后将细胞悬浮液转移到固体培养基板上进行培养。
这种方法适用于细菌的长期储存，但相关设备和操作比其他保存方法更复杂。
7.一种陶瓷珠保存方法
在上述保存方法的基础上，微生物研制出一种陶瓷珠保存方法。 与传统的保存方法相比，这种方法具有更好的保存效果，方便，减少了反复冻融循环造成的损害。
每个陶瓷珠冷冻管含有 12 个磨砂陶瓷珠和培养保存液。 取对数生长菌株并将它们转移到冷冻管中，倒置并混合，此时菌株将均匀分布在保存溶液中。 用移液器除去保鲜液，并在表面张力的作用下，每颗瓷珠上覆盖一层保鲜液，应变储存在这层保鲜液中。 含有培养物的冷冻管可以转移到 -80°C 进行长期冷冻（通常约为 1 年）。
需要使用培养物时，将冷冻管从-80冰箱中取出，轻轻摇动分散陶珠，取陶珠接种在培养基板上进行条状培养，或接种到液体培养基中进行**培养。 接种后，迅速将冷冻管放回冰箱。
对于厌氧菌株，我们还可以提供含有还原剂的厌氧保鲜液，并将菌株真空包装，以避免因暴露于氧气而死亡。
保护文化的方法有很多种，但原则是相似的。
首先要做的是选择好的纯种马。 使用孢子，孢子和微生物克隆;
其次，创造低温、干燥、缺氧等条件，抑制微生物的代谢功能，使其生命活动降低到最低水平或进入休眠状态，从而延长菌株的寿命，保持菌株的原始形态，防止突变。 无论采用哪种保存方法，都要求细菌不死亡，不被外来细菌污染，在保存过程中不降解。
短期存储 坡口保存
倾斜储存是目前最常用的短期储存方式，操作简单，使用方便，但需要定期接种疫苗。 因此，工作量大，通过次数容易变异。 因此，它仅适用于经常使用的短期培养物。
1.制备培养基时，营养物质的浓度应略低，特别是糖类应尽可能多，如果菌株产生酸，应加入少量碳酸钙;
2.倾斜面填充量，倾斜后斜面不应超过试管长度的1 2;
3.斜坡栽培，温度略低于最佳温度，时间稍长;
4.生长完成后，密封存放在 2-8 冰箱中。 对于每个通道，霉菌、放线菌、孢子菌可储存1-3个月，酵母菌可储存2个月，细菌可储存1个月。
激活和使用：
从冰箱中取出斜坡，挑选菌落繁殖细菌，或切割霉菌进行繁殖和培养，培养完成后即可使用。
长期储存：冷冻储存。
冷冻保存是最常用的长期储存方法之一，适用于各种微生物。 与倾斜存储相比，它减少了工作量并延长了存储时间。
1.准备新鲜的斜面或平板培养物，10%无菌甘油溶液;
2. 2.用甘油溶液洗去细菌或孢子以形成细菌悬浮液;
3. 3.将每管 1 毫升的细菌悬浮液分装到冷冻管中，并放入程序冷却箱中;
4. 4.将程序冷却箱放入-80冷冻室冷冻;
5.可保存1-2年。
激活和使用：
1.从冰箱中取出冷冻培养物，准备溶解在水浴中，室温下不要熔化;
2.将菌株迅速放入水浴中快速溶解，40 个细菌和 30 个真菌，约 2 分钟后全部溶解，然后接种到相应的培养基中;
3.在适当的条件下完成培养。