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1.适用范围
适用于食品生产车间空气细菌数量、产品接触面（直接或间接）、内包装材料、人手表面等环境微生物的采样检测。
引用
GB 14881-2013 食品安全国家标准 食品生产通用卫生规范。
GB 15979-2002《一次性卫生用品卫生标准》。
gb 4789.1-2016年《食品安全国家标准食品微生物检验总则》。
gb 4789.2-2022年食品安全国家标准食品微生物学检测菌落计数测定。
gb 4789.3-2016年食品安全国家标准食品微生物检测大肠菌群计数。
设备与材料
培养箱：36 1;
冰箱 0-4 ;
恒温水浴 46 1 ;
电炉：可调试;
平盘：盘底直径9cm;
移液器：10毫升，标有0以 1 ml 为单位缩放;
移液器：5毫升，标有0以 1 ml 为单位缩放;
试管; 试管架; 消毒棉签;
定时器; 移液器：容量为10ml;
灭菌规格板内径为（10cm 10cm）;
酒精灯; 打火机;
酒精棉球; 玻璃蜡笔;
托盘。 营养琼脂培养基; 乳糖胆盐培养基; 曙红蜜兰琼脂培养基;
生理盐水，定量分装在玻璃瓶和试管中，灭菌。
程序
4.1、生产车间空气中细菌菌落的取样培养。
4.1.1.取样前，将配制好的营养琼脂培养基36 1孵育24小时，除去污染培养基，检查是否存在污染。
4.1.2.取样时，将含有营养琼脂培养基（直径9cm）的培养皿放在取样点（约桌子高度），打开盘子盖，将培养皿暴露在空气中5min以上。 具体要求如下：
4.1.2.1、室内空气中的室温区域不得超过30m，对角线上应设置两点，两点距墙1m;
4.1.2.2、室内面积30m以上，内、中、外三点，周边三点距墙1m。
4.1.3.将收集的培养基送至实验室，使其孵育36 1孵育48 h，观察结果，并计数平板上的菌落数。
.2. 接触面的取样和检测
.2.1、设备表面及内包装材料表面：
将内径为5厘米5厘米（或其他至少25厘米2）的灭菌板放在被测物体表面，用浸泡在灭菌盐水溶液中的棉签10次，然后剪掉棉签接触手的部分，将棉签放入装有10毫升灭菌盐水的采样管中。
4.2.2.人力：
考生将手指并拢，用蘸有生理盐水的棉签从指尖到右手手指表面来回揉搓1010毫升
4.2.3.菌落检测总数：
无菌操作中，取已收集的各试样管充分混合后取试样溶液1ml，放入灭菌培养皿中，倒入营养琼脂培养基，平行接种各试样两板，孵育36 1孵育48 h，计数平板上菌落数。
4.2.4. 大肠菌群计数检测
4.2.4.1.初步发酵实验。
收集的各型样品瓶的试样溶液充分混合后，接种3管十二烷基硫酸酯胰蛋白胨（LST）肉汤，每管接种1ml，置于36 1培养物中24 h，平行制备3个样品;
4.2.4.1.1.对于气体生产商，进行第一次发酵实验。
4.2.4.1.2.如无产气，继续培养至48 2小时，如有产气，进行**发酵实验; 如果不产生气体，则报告肠内大肠菌群阴性;
4.2.4.2**发酵实验。
从带接种环的产气LST肉汤管中取出1环培养物，移植到亮绿色乳糖胆盐肉汤（BGLB）管中，在36°C下1°C孵育48h，观察产气情况。 产气者被算作大肠菌群阳性管。
4.2.4.3 份最可能大肠菌群数量 （MPN） 的报告。
按 42.4.2 确认了大肠菌群的 BCLB 阳性管数，并检索了 MPN 表（见附录 B）以报告每克 （ml） 样品中大肠菌群的 MPN 值。
5 报告结果
查询最可能的大肠菌群数 （MPN） 搜索表。
其中：Y1 – 空气中的菌落总数，CFU M3
Y2 – 食品接触表面的菌落总数，CFU cm
Y3 – 每只手在人手表面的菌落总数 cfu。
Y4 - 食品接触表面的大肠菌群（MPN M2），人手表面的大肠菌群 MPN 手。
a - 平板上的平均菌落数。
S1 – 板坯面积。
S2 – 采样区域 cm
.生产环境卫生指标
7.记录