介绍
行为测试在精神疾病研究中非常重要,尤其是在啮齿动物中。 通过观察啮齿动物的行为变化,结合现代临床实践中精神疾病的症状,可以加深对精神疾病的认识,促进药物的开发。
不同的实验室根据研究目的选择不同的行为测试方法。 基于绝望方面,对纳入文献中涉及的行为检测方法进行了统计分析。 这些方法的选择与疾病模型和研究重点密切相关,为精神疾病的研究提供了丰富的数据和参考。
1 强迫游泳测试 (FST):
1977年,法国学者波索特首先发明了一个实验,并将其应用于行为绝望的抑郁模型,称为“强迫游泳测试”(FST)。 这个实验表明,啮齿动物在无法摆脱困境时放弃了挣扎,这被认为是“行为绝望”的标志。 这种行为不仅是对体力或运动减少的反应,也是动物精神活动水平的指标。 FST已成为模拟抑郁症患者绝望的好方法,因此在抑郁症研究中得到了广泛的应用。
首先,在进行FST实验之前,需要排除游泳能力差的动物。 适应性游泳通常为 10 到 15 分钟。 驯化后,将小鼠或大鼠置于湿度为45%至65%,温度为21至23摄氏度的实验环境中,然后每隔24小时进行一次正式实验。 在实验中,选择了充水圆柱体,其高度分别约为50 cm和30 cm,直径分别为30 cm。 液位高度应调整到不能触摸大鼠尾巴的程度。 驯化后,将动物置于水中并记录,小鼠或大鼠的记录时间为5至10分钟。 一些团队会将动物放入水中 10 分钟,然后记录游泳 4 到 5 分钟的时间。 记录完成后,将动物从水中取出,吹干并恢复体温,在交换每只动物时注意换水。
FST的主要衡量标准是动物在水中的行为,其中包括“休息时间”。 休息时间是指动物保持漂浮的时间,身体略微蜷缩,只有鼻孔暴露以保持呼吸,前爪停下来刮胡子,后爪偶尔划水。 长时间休息的动物被认为表现出绝望的行为,这一特征清楚地反映了抑郁表型。
在进行FST实验时,需要注意实验环境和水温等因素,因为它们是影响实验结果的重要因素。 首先,实验的强光可能会缩短啮齿动物的静止时间,不利于准确反映它们的抑郁状态。 因此,FST实验应在不超过0环境光下 96 瓦平方米。 其次,水温也是影响FST的重要因素之一。 研究表明,水温与动物的休息状态呈U型关系,水温过低或过高都会缩短不动时间,因此最好将水温保持在20至25摄氏度的范围内。
2 尾部悬架测试(TST):
1985 年,Steru 等人提出了尾部悬吊测试 (TST),用于构建行为绝望模型。 现代研究表明,TST 可用于广泛测量广谱抗抑郁药的效果,因为它价格低廉、简单且易于自动化。 在这个实验中,啮齿动物的尾巴是悬空的,由于尾巴的倒置末端,动物会剧烈挣扎,一段时间后,它将无法摆脱这种状态,并且会显得一动不动,这种状态类似于抑郁症患者的绝望。
根据文献摘要,实验团队通常将小鼠置于昼夜照明12小时的实验环境中,湿度控制在45%至65%,温度为21至23摄氏度。 在实验中,使用胶带将鼠标的尾端悬挂在距离地板 20 至 25 厘米的吊杆上。 当实验动物较多时,为了防止它们互相观察或相互影响,中间使用隔板,以确保动物悬挂在隔间**中,并且宽度和深度足够大,不会与墙壁接触。
在TST实验中,观察小鼠在悬浮时的行为,特别是非挣扎状态被视为不动时间。 记录时间通常为5至10分钟,一些实验团队将实验时间延长至10分钟,随后在记录后4至5分钟不动。 长时间不动的小鼠被认为表现出绝望的行为,这是评估TST实验中抑郁表型的重要指标。
虽然TST的原理与FST相似,但文献报道不同品系的啮齿动物对实验结果的影响更大。 例如,老鼠体型较大,垂尾时可能会出现,因此不适合TST。 同时,有实验团队指出,C57BL6小鼠有沿尾部向上攀爬的倾向,对TST测试结果影响较大。 为避免不同菌株对实验结果的干扰,建议在实验前测量实验动物尾巴占总长度的百分比,以确定其攀爬程度。 对于有明显上升趋势的实验动物,可以将其排除在数据分析之外,以保证实验结果的准确性和可靠性。