tau蛋白泛素化鉴定工作流程

Tau 蛋白是一种微管相关蛋白，主要存在于神经细胞中，参与微管的稳定。 在某些神经退行性疾病中，例如阿尔茨海默病（Alzheimer）。'S 病，AD），tau 蛋白可能异常磷酸化和聚集，形成所谓的 tau 团块或神经原纤维缠结。

泛素化是蛋白质的翻译后修饰，涉及将一个或多个泛素分子连接到靶蛋白上。 这种修饰通常标记蛋白质进行降解，但也参与许多其他细胞过程。

图1泛素化修饰研究路线。

tau蛋白泛素化的鉴定主要是为了确定tau蛋白是否泛素化以及泛素化发生在哪些位点。 以下是基本步骤：

1.样品制备：

Tau 蛋白是从相关细胞或组织中提取的。

2.免疫沉淀：

使用针对 tau 蛋白的抗体进行免疫沉淀，以富集样品中的 tau 蛋白。

3.蛋白质电泳：

沉淀的蛋白质通过SDS-PAGE分离。

4. 免疫印迹分析：

使用抗泛素抗体进行蛋白质印迹分析，以检测 tau 蛋白是否泛素化。

5. 质谱分析

为了准确识别tau蛋白上的泛素化位点，可以进行进一步的质谱分析。

6. 数据分析

基于质谱数据解析tau蛋白的泛素化位点。

tau蛋白的泛素化可能与其在疾病中的聚集和降解机制有关，因此其鉴定对于了解神经退行性疾病的分子机制具有重要意义。