Edman降解法是测定肽氨基酸序列的经典方法

Edman降解法是测定肽和蛋白质氨基酸序列的经典方法。 这种方法由 Pehr Edman 在 20 世纪 50 年代开发，至今仍被广泛使用，尤其是对于较短的肽片段。

一、原理：

1.Edman 降解基于从肽的 N 末端连续去除氨基酸并对其进行鉴定的原理。

2.首先，肽的N端与Edman试剂（苯酚异硫氰酸）反应形成稳定的酯类化合物。

3.随后，在弱酸条件下，这种酯裂解并释放出与EDMAN试剂形成的衍生氨基酸。 这个过程不会破坏多肽的其他部分。

4.释放的衍生氨基酸可以通过色谱法或其他方法进行鉴定。

5.重复上述过程，可以逐个鉴定多肽的氨基酸序列。

2.优点：

1.特 异性：

Edman降解方法非常特异性，仅针对N端氨基酸。

2.准确性：

理想情况下，这种方法可以提供非常准确的测序结果。

3. 限制：

1.长度限制：

虽然该方法非常准确，但通常仅适用于较短的肽片段，通常在 50-60 个氨基酸以内。 对于较长的肽或蛋白质，需要将它们切割，然后单独测序。

2.敏感性：

需要足够数量的样本来确保测序的准确性。

四、应用：

虽然现代质谱技术在蛋白质和肽测序中已经变得非常流行，但Edman降解方法仍然是一种有价值的工具，特别是当质谱方法不适用或需要验证质谱结果时。