兔补体片段 3B （C3B） ELISA 试剂盒实验方案。
1.实验原理。
本研究采用间接酶联免疫吸附试验（indirect endirect ELISA）检测兔补体片段3b（C3b）。 间接ELISA的基本原理是利用抗原与抗体的特异性结合，通过酶和底物的显色反应放大信号，从而实现对靶蛋白的定量检测。
2.实验程序。
1.样品处理：取适量待测兔血清样品，离心除去悬浮物和杂质。 取上清液，即待测兔补体片段3b（C3b）样品。
2.包被：将抗原（兔补体片段3b）包被在微孔板的孔中，加入适量的封闭溶液（无菌盐水或含10%小牛血清的生理盐水）以阻断非特异性结合位点。 在37小时孵育1小时，使抗原与板孔紧密结合。
3.洗涤：洗涤微孔板孔板3次，加入洗涤液（005%吐温-20）约250μl以除去未结合的抗原和杂质。
4.上样：将待测兔血清样品加入微孔板孔中，设置阴性对照组和阳性对照组。 同时加入适量的酶标二抗（抗兔IgG抗体），捕获抗原-抗体复合物。 在37小时孵育1小时，使抗体与抗原-抗体复合物结合。
5.洗涤：洗涤板孔3次，每次加入约250μl洗涤液，以除去未结合的酶标记的二抗和杂质。
6.加入底物：在微孔板孔中加入适量的底物溶液（四甲基联苯胺），在37下孵育15-30分钟，使底物与酶标记的二抗发生显色反应。
7.停止反应：加入适量的终止液（2M硫酸），使底物与酶标记的二抗之间的显色反应中止。
8.检测：使用酶标仪在450nm的波长下测量每个孔的光密度值（OD值），并记录数据。
9.结果：根据阴性对照组和阳性对照组的OD值计算待测样品的相对OD值。 设定一个临界值，通常为阴性对照组OD值的21次。 相对 OD 值大于临界值为正值，反之亦然。
10.数据分析：对实验数据进行统计分析，绘制相应的图表和曲线，分析兔补体片段3b（C3b）表达水平与疾病或其他生物过程的关系。
3. 注意事项。
1.实验过程中应保持无菌操作，以避免污染。
2.该套件应在有效期内使用，并严格按照套件说明进行操作。
3.实验结果仅供参考，具体应用需要结合其他实验结果和临床数据进行综合分析。