质谱是一种高灵敏度、低样品、快速、同步分离和鉴定的方法。 它具有许多优点,使其广泛应用于许多领域。 随着质谱定量检测技术的不断发展,稳定同位素化合物作为稳定同位素标记内标(SIL-IS)被公认为质谱定量分析领域的最佳选择。
稳定同位素是一种与分析物具有几乎相同的分子结构、化学性质、色谱和质谱行为的物质。 该化合物的分子结构与分析物非常相似,有效地消除了电离变化和基质效应,提高了分析的准确性和可靠性。
由于稳定同位素化合物的这些特性,它们被广泛应用于临床医学研究和生物医学、环境科学、食品检测等领域。 例如,在临床研究中,稳定同位素可以作为内标定量来分析生物样品中的药物浓度,以更好地了解药物在体内的代谢过程和疗效。 在环境科学领域,稳定同位素可用于研究污染物的传播途径,以及评估污染对生态系统的影响。 在食品检测领域,稳定同位素化合物可用于检测食品中的添加剂和有害物质,确保食品安全。
稳定同位素可作为内标,减少基质效应,减少实验中的人为错误,提高检测的准确度和精密度,同时检测多个数据,提高实验效率,具有诸多好处。 那么稳定同位素作为内标的关键定量指标有哪些,如何选择稳定同位素内标呢?
1.稳定同位素被用作内标的关键定量指标。
a.同位素产物纯度:通常为98%。 常指色谱纯度,如LCMS MS、GCMS、HPLC等,如果产物吸收或MS较弱,也可采用NMR检测。
b.同位素富集:98%一般。
c.同位素产品有效期:同位素化合物内标在有效期内使用。
2.如何选择稳定同位素内标。
a.除非实验有特殊要求,一般不选用活性氘(2H)取代的同位素产物作为内标(如氨基、羧基、羟基上的氢被氘取代),这些活性氘很容易交换成氢。
b.同位素标记的 13c 和 15n 化合物更稳定,但 13c 和 15n** 更昂贵。 目前市面上含氘(2H)的同位素产品价格相对便宜,数量也比较多,因此在满足实验要求的情况下,也可以选择氘标记作为内标。
c.在选择氘(2h)生成化合物作为内标时,一般选择分子量比非同位素产物大3个或更多(即含有3个(d3)或更多氘原子)的产物。