NHS-生物素是一种常用的生物交联试剂,化学名称为N-羟基琥珀酰亚胺-生物素。 它是一种活性酯化合物,通过与生物分子相互作用制成氨基反应实现与目标分子的共价交联。 以下是NHS-BioTin作为生物交联试剂的主要应用:
1.亲和纯化:NHS-生物素能与含有氨基的生物分子(如蛋白质、肽、抗体等)交联,在生物分子和生物素之间形成共价结合。 这样,就可以利用它生物素亲和纯化将目标分子与其他非特异性蛋白质分离,进行纯化和富集。
2.免疫染色:NHS-生物素可用作与抗体交联的标志物。 通过在抗体上标记生物素,可用于免疫染色和免疫组化实验。 在免疫染色过程中,生物素化抗体与靶分子结合,并可通过酶-生物素-链霉亲和素(HRP-**idin biotin)系统相互作用使目标分子可见。
3.细胞表面标记:NHS-生物素可以与细胞表面的氨基酸残基交联,在细胞表面标记生物素。 这样,可以通过使用荧光素-链霉亲和素(链霉亲和素-荧光染料)相互作用用于细胞标记、细胞追踪和细胞分选。
4.蛋白质-蛋白质交联:NHS-BioTin也可用于蛋白质-蛋白质交联实验。 一种是通过将NHS-生物素分别与两种靶蛋白交联而形成的跨越两种蛋白质的生物素桥。这使得研究蛋白质-蛋白质相互作用、复杂组装等成为可能。
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