离子交换色谱法它是一种根据电荷质量和数量的差异分离不同生物分子,并根据官能团的带电性质分为阳离子交换树脂和阴离子交换树脂的色谱技术。 由于大多数生物分子都具有酸性基团或碱性基团,并且可以通过调节缓冲液的pH值来改变其带电的性质和数量,因此在生物分子与带相反电荷的阴离子交换剂或阳离子交换剂结合后,改变流动相中的离子强度或pH值后,可以根据结合能力将生物分子从弱到强洗脱, 从而达到分离纯化的目的。
本文以Borglon的离子色谱树脂为例,介绍了离子色谱树脂的应用以及不同类型树脂的特点。
1、离子交换树脂的应用
1.阳离子交换树脂的应用:
单抗体、双特异性抗体和抗体-药物偶联物 (ADC)。
疫苗和病毒样颗粒。
病毒载体、外泌体、脂质纳米颗粒等
2.阴离子交换树脂的应用:
单抗体、双特异性抗体和抗体-药物偶联物 (ADC)。
酶、激素和血液制品。
疫苗、病毒载体、质粒和寡核苷酸。
在流通模式下具有出色的 DNA 清除率。
离子交换色谱的特点:
高分辨率。 高容量。 高产。
应用范围广。
良好的物理和化学稳定性。
简单的就地清洁。
二、离子交换树脂的选择
1.配体类型
按官能团的带电性质分为阳离子交换和阴离子交换,按它们在溶液中的电离程度分为强离子交换基团和弱离子交换基团,常用的离子交换基团如下
强离子交换树脂具有相同的离子交换容量,当pH值发生变化时,在很宽的范围内充满电,而弱离子交换树脂的选择性不同,但不适用于极端pH值。 在建立纯化方法时,在确定离子交换模式后,首选强离子交换树脂,当强离子交换树脂无法达到所需的选择性且未达到预期的分辨率时,可以尝试弱离子交换树脂。
2.脚手架类型
基架之间的主要区别在于填料颗粒的大小,这提供了流速和分辨率的差异。 根据支架的材料,博格龙离子色谱树脂分为以下几类:
由于填料耐受的最大流速不同,分离度和载样量不同,各纯化步骤的目的和要求也不同,捕获阶段的主要目的是分离、富集和稳定蛋白质,首先考虑载样量和流速中间纯化阶段需要去除大量杂质,容量和分离度均应兼顾在精纯阶段去除与目标样品非常相似的痕量杂质或物质需要尽可能高的分辨率树脂。 同时,样品体积和纯度在纯化过程中变化很大,需要结合具体的纯化步骤选择合适的树脂。
相关填料的具体参数信息可以在博格隆官网查看。
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