检测细胞衰老现象的方法和步骤

小夏 健康 更新 2024-01-29

细胞衰老这是一种细胞功能减弱并在正常环境条件下逐渐死亡的现象。

检波细胞衰老方法步骤:

1.细胞接种前,将灭菌的细胞片预先置于6孔培养板中,每孔加入1 10e5个细胞,在37 5%CO2条件下培养过夜,使细胞在细胞片上生长。

2.在超净工作台中吸出6孔培养板中的培养基,加入1 PBS,洗涤细胞一次,然后加入2%甲醛02%戊二醛固定液,室温固定3-5分钟。

3.吸收并丢弃2%甲醛02%戊二醛固定液,加入1 PBS,洗涤细胞3次,每次3分钟。

4.吸出1 PBS,加入X-gal溶液浸没细胞切片,37孵育4 8小时或过夜,并用保鲜膜涂覆6孔培养板,以防止染料蒸发。

5.取出细胞爬行器,用去离子水冲洗两次,再次用固定液固定4分钟,然后用流水轻轻冲洗。

6.按此顺序脱水细胞载玻片,透明 95%酒精I(2分钟)95%酒精(2分钟)100%酒精I(2分钟)100%酒精I(5分钟)二甲苯I(2分钟)二甲苯(2分钟)。

7.中性口香糖安装。

8.在普通光学显微镜下观察衰老细胞的形态。

在每个显微镜下计数 400 个细胞,以确定细胞群中 X-gal 染色阳性的细胞(衰老细胞)的百分比,即衰老细胞速率(蓝色染色细胞数,细胞总数,100%)。

预防 措施:

X-gal溶液需要准备即用型。

固定时间过长或固定后未清洗的细胞会影响后续的酶促反应。

PCR检测试剂盒

相似文章

    不怕细胞老化,找“成隍能量提取物”来帮你!

    近年来,随着人们预期寿命的延长和对健康生活质量的追求,老龄化问题已成为全球关注的问题之一。在中国,每年有数以亿计的人因衰老而生病并失去生活质量。然而,现在我们已经迎来了延寿的技术奇点,有望在细胞 领域取得突破。人体有 万亿个细胞,每个细胞都是一个小型的能量工厂,其中软骨 线粒体 负责将食物转化为AT...

    新品上线,细胞活力检测金标准,经典LMV来了!

    背景。基于ATP测定的快速细胞活力测定是细胞活力测定的金标准,在国内外得到广泛应用,被公认为一种高灵敏度的发光检测方法。细胞活力测定在生命科学研究中起着关键作用,常用于细胞增殖测定 细胞活力测定和补体依赖性细胞毒性测定CDC 反映外界因素 如化合物和抗体 对靶细胞的影响,从而评价药物的疗效。 产品原...

    干细胞知识 如何获得人类干细胞?

    人类干细胞是具有自我更新能力并具有多向分化潜力的细胞,可以分化成许多不同类型的细胞。它们在医学研究中具有巨大的潜力,可用于再生医学 组织工程 药物筛选和疾病等领域。目前,人类干细胞主要有两种类型 胚胎干细胞 ESC 胚胎干细胞来源于早期人类胚胎,在胚胎发育的早期阶段获得。这种类型的干细胞具有广泛的分...

    悬崖式老化

    刚才群里看到有人翻了一篇关于悬崖式衰老的文章,大意是有人在短时间内突然衰老了很多,四十多岁的人就像七十多岁的 看到这里,我突然想起,我真的处理过悬崖式衰老的例子。几年前,那年春节前,奶奶一脸奄奄一息,大姨妈和母亲赶回老家服侍老人家。大约两个月后,我的祖母去世了。然后,我妈妈回来了。那时候,我母亲的情...

    干细胞医学展厅设计,21世纪细胞治疗时代

    进入世纪,细胞医学时代已经开启,干细胞医学展厅的设计应运而生。该展厅旨在展示细胞的发展历史 原理和优势 以及它们在各种疾病中的应用效果 干细胞展厅的设计应注重科学性 互动性和趣味性,以吸引更多人了解和关注细胞 以下是一些关键要素 前言 干细胞展厅设计之初应简明扼要地介绍细胞的基本概念 历史和发展趋势...